O ambiente assim como as condições de cultivo e tipo de nutrição podem influenciar na diferenciação celular, resultando em adaptações anatômicas e fisiológicas. O objetivo foi estudar características anatômicas e o teor de clorofila de L. purpurata "carnea" propagadas in vitro quando aplicado diferentes concentrações de uréia. Após 120 dias em sala de crescimento, foram avaliadas características de crescimento, teor de clorofila, aspectos anatômicos foliares e radiculares. Ocorreram modificações nas características de crescimento das plantas cultivadas em meio com 75% de uréia, resultando em aumento do número de folhas, raízes, teor de massa seca foliar e radicular. Houve aumento no teor de clorofila "a" e "b" nos tratamentos com 50, 75 e 100% de uréia. Foi observado aumento da razão de clorofilas "a/b" no tratamento com 25% de uréia, quando comparado com o controle. Na concentração de 75% de uréia foi observado aumento da espessura do mesofilo, limbo foliar, redução do número de camada de células radiculares, espessura do velame, exoderme e cilindro vascular. Tais resultados indicam que a espécie possui tolerância à uréia, possibilitando maior taxa de crescimento em condições in vitro.

The environmental and nutritional conditions during plant growth can influence cell differentiation, resulting in anatomical and physiological adaptations. The objective of this study was to investigate the anatomical characteristics and chlorophyll content of L. purpurataduring in vitropropagation when different concentrations of urea were applied. After 120 days of culture in a greenhouse, the growth characteristics, chlorophyll content, leaf anatomy and root features were assessed. Plants cultivated in a medium containing 75% urea exhibited modifications in their growth, increase in the number of leaves and roots, changes in the leaf and root dry matter content. There was an increase in the contents of "a" and "b" chlorophyll in plants treated with 50, 75 and 100% urea. An increase in the ratio of chlorophyll a to chlorophyll b ("a/b") was observed in plants treated with 25% urea compared with the controls. In plants treated with 75% urea, increases in the thicknesses of the mesophyll and the leaf blade were observed, and reductions in the number of layers of root cells, the velamen thickness, the exodermis and the vascular cylinder were observed. These results indicate that this species has a tolerance to urea and exhibits higher growth in vitro.

Com o objetivo de realizar hibridações que auxiliam em programas de melhoramento genético de flores ornamentais, protoplastos foram isolados a partir de diferentes tecidos (folhas in vitro, pseudocaules in vitro e folhas em sistema hidropônico) de Etlnigera elatior (Jack) R. M. Smith. Foram testados seis diferentes combinações enzimáticas, quatro períodos de incubação, sistema rotatório (40 rpm) ou estacionário no escuro, concentrações de manitol (0,5; 0,6 e 0,7 M), o diâmetro e a viabilidade dos protoplastos isolados. A melhor fonte de explante utilizado no isolamento de protoplastos foi folha in vitro, com rendimento de 22 x10(5) protoplastos g-1 MF. O melhor tempo de incubação foi 15 horas, pois períodos superiores a este causavam diminuição no rendimento e viabilidade dos protoplastos. Protoplastos de folhas in vitro apresentaram viabilidade de 96% e diâmetro de 36,7 µm. Maiores rendimentos foram alcançados em sistema rotatório e no escuro. A melhor combinação enzimática utilizada no atual trabalho foi a 3% Cellulase “Onozuka” R-10 + 2% Meicelase + 1% Driselase + 1% Dextran + 5 mM MES. A melhor concentração de manitol foi de 0,6 M.

The technique of hybridization using plant protoplasts is widely used in plant breeding programs. The purpose of our study is to further characterize the process of protoplast isolation from the ornamental species Etlingera elatior (Jack) R. M. Smith. Protoplasts were isolated from different tissues: in vitro leaves, in vitro pseudostem, and leaves from plants cultivated hydroponically. We tested six enzymatic combinations, four incubation time periods, the rotary system (40 rpm) or steady in the dark, and three concentrations of mannitol (0.5, 0.6 and 0.7 M). The diameter and viability of obtained protoplasts were evaluated. The best source of explants used for protoplast isolation was the in vitro leaves, which yielded 22x10(5) protoplasts g-1 of fresh matter. The optimal incubation period was 15 hours. The in vitro leaves presented a greater viability (96%) and larger protoplasts (36.7 µm diameter). Greater yields were obtained using a rotatory system with protoplasts incubated in the dark. The best enzymatic combination was 3% Cellulase “Onozuca” R-10 + 2% Meicelase + 1% Driselase + 1% Dextran + 5 mM MES, followed by the addition of 0.6 M mannitol.

Plantas de Laelia purpurata var. cárnea propagadas in vitro e mantidas em sala de crescimento e em casa de vegetação foram submetidas a diferentes intensidades e qualidade espectral de luz, envolvidas com diferentes malhas coloridas: azul, vermelha e preta. Foi observado que a intensidade e qualidade espectral de luz interferiram de forma significativa em todos os parâmetros analisados, aos 120 dias de cultivo. Plantas cultivadas sob malha azul em sala de crescimento e casa de vegetação apresentaram maior espessamento da epiderme na face adaxial (31,73 e 35,46µm), respectivamente, diferindo estatisticamente quando comparado com os demais tratamentos. Foi observado aumento significativo no número de camadas de células do velame em raízes de plantas cultivadas em casa de vegetação, independente da malha de sombreamento, quando comparadas com as de sala de crescimento. Em secções transversais de raízes de plantas cultivadas em casa de vegetação sob malha azul, foi observada maior diferenciação dos tecidos (velame, exoderme, córtex e cilindro vascular).

in vitro propagated orchid (Laelia purpurata var. cárnea) were maintained in a growth chamber in a greenhouse and subjected to different spectral intensities and quality of light, using different colored shade-net (blue, red and black). It was observed that the light intensity and spectral quality influenced significantly all the parameters analyzed at 120 days of cultivation. Plants cultivated under blue color shade net at growth chamber and greenhouse presented higher thickening of epidermis on the adaxial face (31.73 and 35.46µm), respectively, and were statistically different when compared with other treatments. It was observed a significant increase in the number of velamen cell layers in plant roots grown in the greenhouse, regardless of the color shade-net used when compared with plants cultivated at growth chamber. It was observed a higher differentiation of tissues (canopy, exodermis, cortex and vascular cylinder) in cross sections plant roots grown in greenhouse under blue shade-net.

Azadirachta indica A. Juss, popularmente conhecido como nim, é uma espécie arbórea que se destaca por possuir substâncias de ação inseticida, fungicida, bactericida e nematicida. Sementes de nim foram inoculadas em meio de cultura WPM (Wood Plant Medium) contendo diferentes concentrações de ácido giberélico (GA3) (0; 3,0; 6,0; 9,0; e 12,0 mg L-1). Após 30 dias, cotilédones obtidos a partir de plântulas germinadas in vitro foram inoculados em meio WPM suplementado com ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1) e, ou, 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1). As culturas foram incubadas no escuro, a 28 ºC. Os calos formados foram avaliados com base na sua coloração e textura, e três subcultivos foram realizados mensalmente em meio WPM contendo 2,0 mg L-1 BAP, na presença de luz. A cada 30 dias, avaliou-se o número de brotos formados a partir dos calos subcultivados. Entre os meios testados, o mais apropriado para germinação in vitro de nim foi o WPM na ausência de GA3. Explantes cotiledonares cultivados em WPM suplementado com 2,0 mg L-1 de BAP promoveram a maior formação de calos com potencial morfogênico. Quando esses calos foram transferidos para meio de composição similar, obteve-se alta formação de brotações até o terceiro subcultivo.

Azadirachta indica A. Juss, popularly known as neem, is a woody species widely used because of its insecticide, fungicide, bactericide, and nematicide properties. Seeds of neem were inoculated in WPM (Wood Plant Medium) containing different concentrations of gibberelic acid (GA3) (0, 3, 6, 9, and 12 mg L-1). After 30 days, cotyledons were inoculated in WPM supplemented with 0.0; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 acid 2,4-phenoxyacetic acid (2,4-D) and/or 0.0; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 6-benzylaminopurine (BAP). The cultures were kept in the dark at 28 ºC. Differentiated calli were evaluated based on their coloration and texture, and three subcultures were carried out on a monthly basis in WPM medium with 2.0 mg L-1 BAP, in the presence of light. Every 30 days, the number of differentiated shoot-buds was evaluated. WPM medium lacking GA3 promoted the highest in vitro seed germination indexes. Cotyledonary-derived explants cultured in WPM medium with 2.0 mg L-1 BAP yielded calli with high morphogenic potential. When those calli were transferred to medium with similar composition, a high shoot formation was achieved up to the third subculture.